sgRNA合成

服務(wù)介紹

       sgRNA為體外合成的高純度RNA，可與Cas9蛋白質(zhì)結(jié)合形成復(fù)合物，通過電轉(zhuǎn)、脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染、顯微注射等方式導(dǎo)入細(xì)胞，以核定位信號(hào)肽NLS進(jìn)入細(xì)胞核，進(jìn)行基因編輯。

　　相對(duì)于其它導(dǎo)入編輯元件的方式，導(dǎo)入Cas9/sgRNA復(fù)合物的基因編輯方式具有幾個(gè)重要優(yōu)點(diǎn)：1.所有元件都是成熟形態(tài)，不需經(jīng)過轉(zhuǎn)錄、翻譯，因此沒有密碼子不兼容、轉(zhuǎn)錄受調(diào)控、轉(zhuǎn)錄效率低下等問題，適用于各種生物的各種細(xì)胞，包括干細(xì)胞、受精卵，最大程度保證編輯的成功。2.編輯元件沒有整合進(jìn)入基因組的風(fēng)險(xiǎn)，Cas9和sgRNA都是細(xì)胞可代謝的，最終將代謝消失，不留痕跡。在需要進(jìn)行動(dòng)物試驗(yàn)或臨床試驗(yàn)的場(chǎng)合，這一點(diǎn)尤為重要。同樣，若需進(jìn)行多輪編輯/篩選，這一點(diǎn)也很關(guān)鍵。3.導(dǎo)入Cas9/sgRNA復(fù)合物具有更高的編輯專一性。4.方便、高效。確定靶向序列后，3個(gè)工作日即可完成Cas9/sgRNA復(fù)合物的準(zhǔn)備，而且可以高通量平行，也可以進(jìn)行臨床規(guī)模的大量制備。

　　請(qǐng)指定靶向DNA序列的20個(gè)堿基，艾基生物提供對(duì)應(yīng)的sgRNA。sgRNA合成采用體外轉(zhuǎn)錄法，具有生物相容性好、純度高、活性高的優(yōu)點(diǎn)，并且可以擴(kuò)大到g級(jí)合成。一次反應(yīng)可獲得>100ug sgRNA。合成周期3個(gè)工作日。

　　艾基生物的sgRNA訂制合成專為高要求的基礎(chǔ)研究及臨床轉(zhuǎn)化而設(shè)計(jì)，具有超低的內(nèi)毒素含量(達(dá)到人注射用標(biāo)準(zhǔn))，是進(jìn)行科研及臨床應(yīng)用開發(fā)的最佳試劑。sgRNA為RNase-free水溶制劑，由于RNA易降解，須在-80℃儲(chǔ)存。使用時(shí)必須嚴(yán)格按照操作RNA的要求進(jìn)行操作。本試劑為無菌、RNase-free、DNase-free試劑，可直接用于細(xì)胞培養(yǎng)或動(dòng)物試驗(yàn)。

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